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pCr产物纯化

你说的是PCR产物的纯化吧? 先用溶液溶解含DNA的琼脂糖凝胶,然后加入有吸附柱的离心管中 吸附柱吸附DNA 离心,将含琼脂糖的溶液去除; 接下来加入去盐的漂洗液进一步去除杂质;因PH值的原因,DNA还是吸附在吸附柱上的膜上; 最后加入纯水或者TE...

不是的,PCR纯化试剂盒—是直接水溶解的PAC产物就可以回收,回收效率高,但是只适合单一条带需要纯化测序的时候使用。 PCR凝胶试剂盒—是在PCR产物是混合物,有多条杂带的情况下,先跑胶将杂带分离,然后在将你所要的条带位置的胶切下回收,后者的...

不可以。 首先,采用的是质粒模板; 其次,扩增得到的非单一条带,如果不纯化直接酶切,那么得到的将是带有相应酶切位点的几种片段,继续试验的话,菌落PCR鉴定时可能会出现几种不同大小的条带。 第三、PCR产物里面缓冲液并不是合适的酶切缓冲液...

一般不建议这样做。除非你做巢式PCR。 以PCR产物作为模板,首先必须保证你的PCR产物经过纯化,成分单一,因此,无论怎样,第一轮PCR产物都要进行纯化,并且必须使用高保真酶以减少碱基错配的可能。这样才能以第一轮PCR产物为模板进行第二轮扩增...

不同公司的会有差异,主要表现在试剂盒包含的东西不一样,像国外的基本都是匹配好了的,国内的也有一些匹配好了的,像一氪生物的,仅供参考!

SAP酶; 过膜; 切胶过柱纯化; 磁珠法

胶回收是胶回收,纯化是纯化。胶回收的过程也能达到纯化的目的,只是因为要跑胶要稍麻烦些,一般用于产物特异性不大好时。纯化相对就要省事多了,但不适用有非特异扩增的产物

一般的纯化方法似乎都会造成小片段的丢失,我可以给你的建议有两个:1 试一下小片段的胶回收试剂盒;2 试一下测序反应后的纯化方法(这个如果你有需要直接HI我)。 酶切产物下游你要做什么啊,为啥非要纯化呢~还有你所说的小片段有多小啊~小于10...

纯化的pcr产物测序需要的要求: (1)扩增产物必须特异性扩增,条带单一。如果扩增产物中存在非特异性扩增产物,一般难以得到好的测序结果; (2)必须进行胶回收纯化; (3)DNA纯度在1.6-2.0之间,浓度50ng/ul以上。 方法 (1) 在PCR反应液中加入3...

其实对于一般克隆来说,PCR产物测序是可以的,然后看看同源性。但是如果对测序结果很严格,比如做点突变,那就需要用高保真Taq酶扩增,然后连T载体后测序,这样测得结果比单纯PCR产物要准确很多!

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